一些手性化合物在低于非手性化合物的濃度下表現(xiàn)出過(guò)載。原因之一是溶解在固定相中的環(huán)糊精 (5-50%) 的量不同。與正常固定相的經(jīng)典前沿峰不同,環(huán)糊精固定相上的過(guò)載峰的特征由拖尾峰表示。即使沒(méi)有超過(guò)色譜柱容量,手性化合物過(guò)載也會(huì)導(dǎo)致分離度下降。第1個(gè)示例是 Rt-βDEXsp 上的芳樟醇分離(圖 1)。柱上的量約為 20 ng(圖 1A)。圖 1B 顯示了相同組分在更高濃度的 200 ng 柱上。請(qǐng)注意,芳樟醇對(duì)映異構(gòu)體開始拖尾,手性拆分有少量損失。即使*大樣本容量為 0。32mm 內(nèi)徑毛細(xì)管柱通常每個(gè)組分 400-500 ng,手性化合物的峰形表明樣品量的三分之一時(shí)過(guò)載。同樣,手性化合物可以相互作用的環(huán)糊精要少得多。圖 1C 顯示了 2 μg 柱上的明顯過(guò)載。結(jié)果是極端拖尾和分辨率完全喪失。
圖 1:在 Rt-βDEXsp 上重載芳樟醇
第2個(gè)例子是 Rt-βDEXsm 上的 2,3-丁二醇(圖 2)。我們?cè)谶@里看到了在 500 ng 柱上(圖 2A)和 25 ng 柱上(圖 2B)之間類似的過(guò)載和拖尾趨勢(shì)。由于異構(gòu)體之間的分離非常好,即使我們可以看到更多的超載,分辨率的損失也沒(méi)有前面的例子那么明顯。
圖 2:丁二醇在 Rt-βDEXsm 上的過(guò)載