對(duì)于HPLC來(lái)說(shuō)，該如何計(jì)算死體積呢。

死體積(dead volume,V0)——由進(jìn)樣器進(jìn)樣口到檢測(cè)器流動(dòng)池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分：進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙（被流動(dòng)相占據(jù)，Vm）、柱出口管路體積、檢測(cè)器流動(dòng)池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過(guò)程，其它3部分只起峰擴(kuò)展作用。為防止峰擴(kuò)展，這3部分體積應(yīng)盡量減小。

死時(shí)間(dead time,t0)——不保留組分的保留時(shí)間。即流動(dòng)相（溶劑）通過(guò)色譜柱的時(shí)間。

測(cè)量系統(tǒng)死體積通常需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)量，常用方法是通過(guò)進(jìn)一針和色譜柱固定相沒(méi)有任何作用的特殊溶液（方法中會(huì)有規(guī)定，例如：尿嘧啶，少量NaNO3或甲醇溶于流動(dòng)相得到的溶液，也有直接用100％色譜純甲醇進(jìn)樣的情形）時(shí)，就會(huì)得到一個(gè)色譜峰，由此峰可以測(cè)得死時(shí)間（t0），這就是t0的實(shí)測(cè)結(jié)果。

然后通過(guò)計(jì)算得到系統(tǒng)死體積:

死體積（V₀) = 死時(shí)間t₀×流動(dòng)相的流速F。