在色譜分析中,正相色譜柱和反向色譜柱是兩種常用的填料類型,其選擇和使用取決于樣品的性質以及所需的分離效果。正相色譜柱的固定相為極性鍵合固定相,而反相色譜柱的固定相為非極性鍵合固定相。
正相色譜柱的固定相通常由具有極性有機基團的硅膠表面鍵合而成。常見的鍵合相包括氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)。這些鍵合相的命名取決于鍵合在硅膠上的有機基團。正相色譜柱用于分離極性化合物,其中組分的保留值隨其極性的增加而增大。流動相通常選擇比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,并可以加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)以調節(jié)流動相的洗脫強度。
反相色譜柱的固定相常為非極性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡稱ODS或C18)或硅膠-苯基等。反相色譜柱使用較強極性的溶劑作為流動相,如甲醇/水、乙腈/水、水和無機鹽的緩沖液等。樣品在反相色譜柱上的保留順序與極性相反,極性較強的組分*先被沖洗出色譜柱,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
正相色譜柱和反向色譜柱的關鍵區(qū)別在于固定相的性質。正相色譜柱的填料極性較強,洗脫順序為由弱到強,而反向色譜柱的填料極性較弱,洗脫順序為由強到弱。這意味著正相色譜柱適合分離極性較弱的化合物,而反向色譜柱適合分離極性較強的化合物。
正相色譜和反相色譜在色譜分析中扮演著不同的角色。正相色譜主要用于分離異構體、極性不同的化合物,以及不同類型的化合物,而反相色譜更適合對于組分極性較強的樣品進行分離。
綜上所述,正相色譜柱和反向色譜柱具有不同的固定相特點和適用范圍。選擇正確的色譜柱類型對于有效的分離和分析非常重要,根據(jù)需要合理選擇正相色譜或反向色譜柱將有助于獲得準確的結果和可靠的分析數(shù)據(jù)。