如果你懂得區(qū)分色譜圖中的峰形,那么必然知道拖尾是代表某些問(wèn)題的一種異常情況,而成因是復(fù)雜的,需要專業(yè)的知識(shí)才能清晰地了解。
一、拖尾的定義
峰形后拖尾是指柱后的峰形變鈍,尤其是在掃描檢測(cè)器檢測(cè)出高峰的時(shí)候,拖尾達(dá)到zui高。這種現(xiàn)象在分析的過(guò)程中將會(huì)帶來(lái)很多麻煩,也會(huì)給分析造成不 良的影響。
二、拖尾的原因
(1) 填料污染:流動(dòng)相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源,填料容易被污染,污染物會(huì)阻礙分離,造成峰形后出現(xiàn)拖尾。
(2) 柱進(jìn)口處有異物:柱進(jìn)口處有雜物,如鐵銹、纖維、硅膠殘?jiān)?,?huì)影響分離效果。
(3) 樣品濃度過(guò)高致使柱超載:樣品濃度過(guò)高,進(jìn)樣過(guò)多,則會(huì)導(dǎo)致柱超載,造成峰形拖尾。
(4) 樣品溶劑不對(duì):選擇不合適的溶劑,或者樣品本身的性質(zhì)導(dǎo)致某些物質(zhì)無(wú)法完全溶解,會(huì)影響柱效,從而導(dǎo)致拖尾。
(5) 柱外效應(yīng):管路過(guò)長(zhǎng)或直徑過(guò)粗,管路接頭不匹配或有死體積,都會(huì)引起拖尾。
三、如何解決拖尾問(wèn)題
(1) 更換新的色譜柱。
(2) 使用分析純的試劑和超純水減少填料污染,對(duì)樣品中的微粒進(jìn)行過(guò)濾處理,使用樣品預(yù)處理柱或者保護(hù)柱。
(3) 減小進(jìn)樣量或者樣品濃度,控制進(jìn)樣體積所在的溶劑總體積。
(4) 選用合適的樣品溶劑來(lái)排除不必要的干擾。
(5) 縮短連接管路,減小死體積來(lái)減小柱外效應(yīng)的影響。
(6) 增加緩沖濃度以改善保留時(shí)間和峰形的問(wèn)題。
(7) 在流動(dòng)相中添加抑制劑以減小硅醇基團(tuán)作用引起的拖尾,如加入25mM三乙胺。
(8) 對(duì)于柱內(nèi)金屬污染造成的拖尾,可以進(jìn)行柱洗滌或者更換新的柱并防止進(jìn)一步的污染。