當(dāng)您結(jié)束了一 天的工作并關(guān)閉儀器時(shí),您可能會(huì)問自己:“將色譜柱儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相條件下真的有必要嗎?它可能會(huì)在測(cè)試結(jié)束時(shí)增加一個(gè)額外的步驟,或者直到您回家后才忘記的事情,但簡(jiǎn)短的回答是肯定的,色譜柱存儲(chǔ)確實(shí)很重要。
就像選擇合適的流動(dòng)相用于特定色譜柱相可以優(yōu)化色譜柱的使用壽命一樣,在測(cè)試后適當(dāng)儲(chǔ)存色譜柱的流動(dòng)相也可以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。在下面的示例中,您可以看到相同的方法和分析物對(duì)相同類型色譜柱的不同批次進(jìn)行分析。
圖1.第1列色譜圖
圖2.第2列色譜圖
圖3.第3列色譜圖
表 1.測(cè)試的3批色譜柱的保留時(shí)間摘要。
分析物
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第1列(圖1)
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第2列(圖2)
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第3列(圖3)
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Methionine
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1.05
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1.02
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0.91
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Homocysteine
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1.17
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1.14
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1.03
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Homocysteine-D3
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1.16
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1.13
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1.02
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Cysteine
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1.60
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1.59
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1.4
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圖1是在適當(dāng)?shù)臈l件下存儲(chǔ)的較新色譜柱。后兩個(gè)是以前在整個(gè)實(shí)驗(yàn)室中發(fā)現(xiàn)的較舊的色譜柱。雖然圖1和圖2中的色譜圖顯示保留時(shí)間相似,但根據(jù)峰形,該色譜柱可能在錯(cuò)誤的條件下儲(chǔ)存。查看圖1和圖3時(shí),不僅峰形大不相同,而且保留率也發(fā)生了變化。這清楚地表明該色譜柱未在推薦條件下存儲(chǔ)。所有三根色譜柱的保留時(shí)間見表1。
如果您在實(shí)驗(yàn)室中找到一根舊色譜柱并將其扔到儀器上以測(cè)試相同色譜柱類型不同批次的保留時(shí)間,您可能會(huì)在舊色譜柱上看到截然不同的保留時(shí)間。這可能是因?yàn)樵撋V柱在很多很多月前被扔進(jìn)抽屜之前沒有正確存放。但是,如果儲(chǔ)存得當(dāng),色譜柱可以使用很長(zhǎng)時(shí)間。
如果您要將色譜柱存放較長(zhǎng)時(shí)間,大多數(shù)制造商建議使用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相儲(chǔ)存色譜柱,但zui好在每天測(cè)試結(jié)束時(shí)使用。應(yīng)沖洗色譜柱以去除任何緩沖、酸性或堿性成分。為此,用與zui近使用的流動(dòng)相相同但不含任何緩沖、酸性或堿性組分的溶劑沖洗色譜柱。讓它沖洗10-20個(gè)色譜柱體積的色譜柱。對(duì)于反相色譜柱,制造商建議儲(chǔ)存在甲醇或乙腈的某種混合物中,zui多含50%的水。但是,正相色譜柱應(yīng)儲(chǔ)存在非極性溶劑中,例如100%乙腈。
同樣重要的是要確保色譜柱被堵塞,并且塞子是緊密的,這樣色譜柱就不會(huì)變干。色譜柱也應(yīng)存儲(chǔ)在 15-30℃之間