柱效是在不影響分離質(zhì)量的情況下嘗試快速運行方法的平衡。當 HPLC 分析快速運行時,您有更多時間運行更多方法,*終節(jié)省系統(tǒng)停機時間和總體成本。幸運的是,有三種簡單的方法可以提高 HPLC 方法的速度,同時保持高質(zhì)量的結(jié)果。
其中包括:
HPLC 柱長
這可能是提高方法速度的*簡單方法。HPLC 色譜柱越短,運行時間越短,這意味著可以更快地通過色譜柱運行更多樣品。然而,柱長越短,峰分離度越低。因此,平衡色譜柱長度和分離度以確保獲得*佳結(jié)果至關(guān)重要。
幸運的是,即使柱長減少,也可以保持分離度。關(guān)鍵是確保滿足分析需求,分離主峰,并選擇合適的高效粒子來實現(xiàn)。
粒徑
固定相顆粒越小,U/HPLC 色譜柱的效率和靈敏度就越高。請記住,粒徑越小,系統(tǒng)中的背壓就越高,因此,這意味著在您需要完成的分離與選擇的粒徑、柱長和背壓之間找到平衡。那個分離。
直接解決 HPLC 系統(tǒng)中壓力增加的一種方法是使用核殼顆粒。這些顆粒由一個實心核心組成,該核心被高孔隙率的外殼包圍。這些與小顆粒的作用相同,可提高系統(tǒng)效率和速度,而不會提高系統(tǒng)壓力。
流動相流速
提高 HPLC 方法速度的*后一種方法是提高流動相的流速。當流動相流速增加時,分析物會更快地通過色譜柱,從而縮短分析時間。
同樣,由于流速的增加會降低色譜柱的效率,因此在不影響色譜柱效率的情況下,確定*佳流速以提高系統(tǒng)速度非常重要。這可以通過在 Van Deemter 圖上繪制流速和柱效來完成。
*終,當 HPLC 分析速度提高時,可以在1天中運行更多樣品,從而提高整個實驗室的工作效率。關(guān)鍵不是為了速度而犧牲柱效或峰分離度,而是要仔細平衡柱長、粒徑和流動相流速。