氣相色譜法和高效液相色譜法都是分離技術(shù),在學(xué)術(shù)和工業(yè)實(shí)驗(yàn)室都得到了廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜法在醫(yī)藥、食品、生命科學(xué)和聚合物等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,而氣相色譜法在石油和石化工業(yè)、香精和香料以及環(huán)境空氣監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用,。您腦海中出現(xiàn)的一個(gè)普遍問(wèn)題是HPLC和GC有何不同,以及哪些因素決定了兩者的適用性。
流動(dòng)相
顧名思義,高效液相色譜法使用液體流動(dòng)相,氣相色譜法使用氣體作為載體。液體通常是相容極性溶劑的混合物,而在氣相色譜中,流動(dòng)相是單一的高純度氣體。
工作溫度
HPLC分離主要在環(huán)境溫度下進(jìn)行,而氣相色譜分離則在高溫下進(jìn)行,高溫可保持在恒定值(等溫)或由溫度程序決定的變量。新型填料也擴(kuò)展了高效液相色譜操作的溫度限制。
化合物的性質(zhì)
氣相色譜分離主要對(duì)分子量高達(dá)數(shù)百的化合物進(jìn)行。這些化合物根據(jù)其揮發(fā)性的不同而分離,并在高溫下保持穩(wěn)定。另一方面,對(duì)于大聚合物和生物分子,通過(guò)HPLC分離的化合物具有較高的分子量,從數(shù)百到數(shù)百萬(wàn)不等。這種化合物只能在室溫下進(jìn)行分析,因?yàn)樵诟邷叵滤鼈內(nèi)菀捉到狻?/span>
柱尺寸
與氣相色譜中使用的氣體相比,HPLC中用作載體的液體通常具有更高的粘度。這導(dǎo)致HPLC中柱背壓增加。正是由于這個(gè)原因,與GC柱相比,高效液相色譜柱更短,直徑更大,GC柱更長(zhǎng)、更窄。增加色譜柱長(zhǎng)度可提高密集峰之間的分辨率。隨著分析速度的加快,用于HPLC的色譜柱長(zhǎng)度短至1厘米。
柱填料
與氣體相比,柱填料對(duì)液體流動(dòng)的阻力更大。氣體也比液體具有更高的固體載體滲透性。HPLC柱的保留模式取決于極性差異或分子大小,而GC分離基于化合物揮發(fā)性的差異檢測(cè)原理
HPLC檢測(cè)通?;跓o(wú)損檢測(cè),如UV、RI、光電二極管陣列檢測(cè)器、電導(dǎo)率和激光檢測(cè)。另一方面,氣相色譜檢測(cè)主要基于破壞性原理,如FID、NPD和FPD。LC和GC共有的質(zhì)譜檢測(cè)器本質(zhì)上是破壞性的。
運(yùn)營(yíng)成本
與用于GC分析的氣體相比,HPLC溶劑成本較高。除溶劑成本外,由于泵和色譜柱中產(chǎn)生的高壓,高效液相色譜系統(tǒng)的維護(hù)成本也較高。相比之下,氣相色譜分析成本更低,維護(hù)成本更低。
高效液相色譜法和氣相色譜法都是多用途的,它們的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。LC–MS–MS和GC –MS–MS等串聯(lián)技術(shù)將檢測(cè)限擴(kuò)展到檢測(cè)和自動(dòng)化的新領(lǐng)域,也有助于提高實(shí)驗(yàn)室通量。