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乳酸,化學名為2-羥基丙酸,其結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子,存在旋光異構(gòu)體,可分為L-乳酸和D-乳酸。
由于人體只有代謝L-乳酸的L-乳酸脫氫酶,所以WHO規(guī)定人體對D-乳酸的日攝入量應少于100mg/kg,對L-乳酸無限制。
因此,在食品和醫(yī)藥行業(yè)中往往需要對L-乳酸及D-乳酸進行拆分與定量。
目前乳酸手性分離常用的方法有酶法、GC法、毛細管電泳法和HPLC法等等。
其中HPLC法的精密度和準確度較好,能快速、靈敏和高效地分離L-乳酸和D-乳酸,企業(yè)與研究單位多選擇此法來測定。
However,小編遇到過許多剛做乳酸手性分離的同學,
在選擇了HPLC方法后,卻不知道應該如何選柱子??
甚至有大意的同學買了根做有機酸的柱子回去做實驗,在實驗室忙活大半天都做不出來,問了小編才知道是柱子選錯了。
為了幫助各位剛做乳酸手性分離的朋友能正確選擇色譜柱,小編在這里給大家分享:
乳酸分析對應的國家標準和幾個常用手性柱的應用,看看哪款色譜柱趁手?
食品** 國家標準食品添加劑乳酸
1.GB 1886.173-2016
根據(jù)標準,符合標準要求有以下4款色譜柱:
01
乳酸對映異構(gòu)體的痕量測定
色譜條件
色譜柱:Astec CLC-L(4.6*150mm,5μm)
柱溫:25°C
流動相:5mmol/L CuSO4
流速:1mL/min
檢測波長:254nm
進樣量:10 μL
1
Sigma Astec CLC-L(4.6mm*150mm,5μm)
貨號:53123AST
固定相:硅膠表面共價鍵合L-脯氨酸衍生物(L32)
02
L-乳酸與D-乳酸含量測定
色譜條件
色譜柱:飛諾美Chirex 3126(D)-penicillamine(4.6 ×150 mm)
流動相:1mmol/L CuSO4溶液
流速:1mL/min
檢測波長:254 nm
2
飛諾美Chirex 3126(D)-penicillamine(4.6 ×150 mm)
貨號:00F-3126-E0
固定相:硅膠表面鍵合青霉胺
03
高效液相法對L-乳酸與D-乳酸的測定
色譜條件
色譜柱:CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)
流動相:2mmol/LCuSO4
流速:0.35mL/min
柱溫:15°C
檢測波長:254nm
3
大賽璐CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)
貨號:21822
固定相:硅膠表面涂敷有N,N-二辛基-L-丙氨酸
04
秸稈發(fā)酵液中L-乳酸與D-乳酸含量測定
(發(fā)酵液樣品)
色譜條件
色譜柱:三菱化學MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)
流動相:0.5g/LCuSO4
流速:0.7mL/min
柱溫:40°C
檢測波長:254nm
進樣量:20μL
4
三菱化學MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)
貨號:CRS10W
固定相:硅膠表面鍵合光學活性體N,N-二辛基-L-丙氨酸
有一個點大家一定要注意?。。ㄇ煤诎澹?/span>
除了乳酸外,乳酸鹽也有相應的國家標準,色譜條件可是和乳酸有稍稍不同的哦~
食品** 國家標準食品添加劑乳酸鈉(溶液)
2.GB 25537-2010
根據(jù)標準,符合標準要求的色譜柱有:
乳酸鹽測定
1
大賽璐CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)
貨號:21822
固定相:硅膠表面涂敷有N,N-二辛基-L-丙氨酸
2
三菱化學MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)
貨號:CRS10W
固定相:硅膠表面鍵合光學活性體N,N-二辛基-L-丙氨酸
接著我們還可以看看關(guān)于乳酸鋅的標準:
食品** 國家標準食品營養(yǎng)強化劑乳酸鋅
3.GB 1903.11-2015
根據(jù)標準,符合標準要求的色譜柱有:
營養(yǎng)強化劑乳酸鋅中L-乳酸鋅的測定
(乳酸鋅樣品)
色譜條件
色譜柱:SUMICHIRAL OA-5000(4.6×150mm ,5μm)
流動相:1 mmol/L CuSO4?5H2O
檢測波長:254 nm
流速:1.0mL/min
柱溫:30°C
進樣量:5 μL
1
住友SUMICHIRAL OA-5000(4.6×150mm ,5μm)
貨號:OA-5000
固定相:硅膠表面鍵合青霉胺
1.OA-5000和OA-5000L有什么區(qū)別?
2.新柱子如何活化?
3.有什么方法可以延長色譜柱壽命?
4.如何縮短保留時間,提高峰形的對稱性?
5.色譜柱進了甲醇還有救嗎?
如果大家需要解決色譜柱使用的問題,或者擔心柱子做不出漂亮的譜圖想試用,或者想色譜柱的使用說明書,都可以加微信撩我們的技術(shù)猿哦~
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